فرق پی سی پی آر اور QPCR کے درمیان فرق ہے. RT پی سی آر بمقابلہ QPCR

Anonim

کلیدی فرق - QCCR بمقابلہ RT RTR

پولیمیریس چین ردعمل ایک ایسی ٹیکنالوجی ہے جس میں ڈی این اے کے مخصوص علاقے میں وٹرو میں اضافہ ہوا ہے. 1983 میں کیری مولس کی طرف سے اس ٹیکنالوجی کے ایجاد کی وجہ سے، سائنسدانوں کو ریسرچ مقاصد کے لئے مخصوص ڈی این اے ٹکڑوں کی ہزار لاکھ کاپی بنانا ہے. فی الحال یہ ایپلی کیشنز کی ایک وسیع اقسام کے لئے کلینکیکل اور تحقیق لیبارٹریوں میں عام اور معمولی کارکردگی کا مظاہرہ کیا گیا ہے. روایتی پی سی آر کی تکنیک کی مختلف قسمیں جیسے آرٹی پی سی آر، نیسڈ پی سی آر، ملٹی ایکس پی سی آر، ق سی پی سی آر، RT - QPCR وغیرہ. RT PCR اور Q PCR پی سی آر کے دو اہم متغیر ہیں. RT PCR اور Q PCR کے درمیان اہم فرق یہ ہے کہ RT PCR تکمیل ڈی این اے (آر این اے) (سی ڈی این) جبکہ ق سی پی آر آر کے استعمال سے جینی اظہار کا پتہ لگانے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے. فلوروسینٹ رنگوں کا استعمال کرتے ہوئے پی سی آر کی مصنوعات کو حقیقی وقت کی مقدار میں پیمائش کرنے کے لئے.

فہرست

1. جائزہ اور کلیدی فرق

2. RT PCR کیا ہے

3. QPCR کیا ہے 4. سائیڈ موازنہ کے ذریعہ - RT پی سی آر بمقابلہ QPCR

5. خلاصہ

RT پی سی آر کیا ہے؟

ریورس ٹرانسمیشن پالیمرسیس چین ردعمل (RT پی سی آر) پی سی آر کا ایک مختلف قسم ہے جس میں آر این اے کے اظہار کا پتہ لگانے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے. ٹشووں میں ایم آر اے اظہار کی تشخیص کے لئے یہ ایک بہت اہم طریقہ ہے. RT پی سی آر کو ملازم کیا جاتا ہے جب نمونہ کی ابتدائی مواد آر این اے ہے. RT پی سی آر میں، ٹیمپلیٹ MRNA سب سے پہلے تکمیل ڈی این اے میں بدل گیا ہے. یہ قدم انزمی ریورس ٹرانپٹیز کی طرف سے catalyzed ہے اور عمل ریورس نقل و حمل کے طور پر جانا جاتا ہے. دوسرا، روایتی پی سی آر کو جدید تجزیہ کار سی ڈی این کے لئے پروموشن کے لئے ملازم کیا جاتا ہے.

RT پی سی آر ایک انتہائی حساس تکنیک ہے جس میں آر این اے نمونہ کی ایک نسبتا چھوٹی سی ضرورت ہوتی ہے. RT پی سی آر عام طور پر آر این اے پرجاتیوں کی تشخیص اور مقدار میں استعمال کیا جاتا ہے، خاص طور پر آر این اے وائرس جیسے انسانی امونیو آلودگی وائرس اور ہیپاٹائٹس سی وائرس.

شناخت 01: RT پی سی آر ٹیکنالوجی

QPCR کیا ہے؟

متعدد پی سی آر (QPCR) پی سی آر کا ایک مختلف قسم ہے جس میں پی سی آر کی مصنوعات کو مقدار میں اندازہ کرنے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے. یہ اصل وقت پالیمرسی چین سلسلہ کے ردعمل کے طور پر بھیجا جاتا ہے کیونکہ یہ حقیقی وقت پی سی آر مشین کا استعمال کرتے ہوئے حقیقی وقت کی پرورش کا اطلاق کرتی ہے. ایک نمونہ میں موجود ہدف ترتیب یا جین کی مقدار کا تعین کرنے کے لئے یہ مناسب طریقہ ہے. QPCR کی دلچسپ خصوصیت یہ ہے کہ یہ ایک ہی قدم میں پرورش اور سچ مقدار میں دونوں کو یکجا کرتا ہے. لہذا، QPCR کی تکنیک کی طرف سے پتہ لگانے میں جیل الیکٹروفورسس کو ختم کیا جا سکتا ہے. پی پی آر آر سی کے ردعمل کے دوران پی پی آر کی مصنوعات کو لیبل کرنے کے لئے QPCR فلوروسینٹ رنگوں کا استعمال کرتا ہے جو بالآخر براہ راست مقدار میں لے جاتا ہے.جب پی سی آر کی مصنوعات جمع ہوتی ہے تو، فلوروسینٹ سگنل بھی جمع ہوتے ہیں اور یہ اصل وقت کی مشین کی طرف سے ماپا جائے گا. آر پی پی آر کو RT پی سی آر کے ساتھ مل کر کیا جا سکتا ہے. یہ RT- QPCR یا QRT - پی سی آر کے طور پر جانا جاتا ہے اور اسے خلیوں یا ؤتکوں میں آر این اے کی سطحوں کا پتہ لگانے کے لئے سب سے زیادہ طاقتور، سنجیدگی اور کم سے کم طریقہ ہے.

SYBR گرین اور تاقمان ایسے وقت میں دو طریقوں ہیں جو حقیقی وقت پی سی آر کے پرانے عمل کی تلاش یا دیکھتے ہیں. SYBR گرین طریقہ یہ ہے کہ فلوروسینٹ ڈائی کا استعمال کرتے ہوئے SYBR گرین نامی اور دوہ بھوک ڈی این اے پیدا کرنے کے لئے ڈائی بائنڈنگ کی طرف سے پرورش کا پتہ لگاتا ہے. تاقمان دوہری لیبل کی تحقیقات کا استعمال کرتے ہوئے کیا جاتا ہے اور ٹیپ پالیمریزس کی تحقیقات کے خاتمے اور فلورفورور کی ریلیز کی طرف سے پریشان کی طرف اشارہ کرتا ہے جیسا کہ اعداد و شمار 02 میں دکھایا جاتا ہے. دونوں طریقوں پر عملدرآمد کے عمل کی ترقی کی نگرانی اور مصنوعات کو حقیقی وقت کی مقدار کی رپورٹ.

حقیقی وقت پی سی آر میں مختلف قسم کے ایپلی کیشنز ہیں جن میں جین اظہار مقدار کی مقدار، مائیکرو آر اے اے اور غیر کوڈنگ آر این اے تجزیہ، SNP جینوٹائپنگ، کاپی نمبر متغیرات کا پتہ لگانے، غیر معمولی تبدیلیوں کا پتہ لگانے، جینیاتی طور پر نظر ثانی شدہ حیاتیات کا پتہ لگانے، انفیکشن ایجنٹوں کا پتہ لگانے وغیرہ وغیرہ..

شناخت 02: مقدار کی پی سی آر ٹیکنالوجی

RT پی سی آر اور QPCR کے درمیان کیا فرق ہے؟

- مختلف آرٹیکل مڈل ٹیبل سے پہلے ->

RT پی سی آر بمقابلہ QPCR

RT پی سی آر ایک پرکشیپشن کی طرف سے جین اظہار کا پتہ لگانے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے.

QPCR ایک ایسی ٹیکنالوجی ہے جس میں ڈی این اے میں اضافہ ہوتا ہے اور حقیقی وقت میں پی سی آر کی مصنوعات کی مقدار میں اضافہ ہوتا ہے.

ریورس ٹرانسپٹیز اینجیم کی شمولیت اینجیم ریورس ٹرانسپٹیز RT RTR کے لئے استعمال کیا جاتا ہے.
اینجیم ریورس ٹرانسپٹیز QPCR کے لئے استعمال نہیں کیا جاتا ہے.
فلوریجیس لیبل کردہ انوولوں کا استعمال ریڈیو پی سی آر کے لئے فلوروسرد لیبل شدہ رنگوں یا تحقیقات کا استعمال نہیں کیا جاتا ہے.
قریبی طور پر لیبل شدہ رنگوں یا تحقیقات QPCR کے لئے استعمال کیا جاتا ہے.
پی سی آر کی مصنوعات کی مقدار 999 QPCR کے ساتھ مل کر جب تک، RT پی سی آر پی سی آر کی مصنوعات کی مقدار میں نہیں ہے. پی پی آر سی پی کی مقدار میں پی پی آر سی کی پیمائش کی پیمائش
شروع کرنے والی مواد
مواد شروع کرنا mRNA ہے. مواد شروع کرنا ڈی این اے ہے.
سی ڈی این اے کی تجزیہ
RT PCR کے دوران ضمیما ڈی این اے تیار کیا جاتا ہے. قریبی ڈی این اے پی پی پی آر کے دوران تیار نہیں ہے.
خلاصہ - RT پی سی آر بمقابلہ QPCR
RT PCR اور QPCR روایتی پی سی آر کے دو ورژن ہیں. RT پی آر آر ٹیکنالوجی کو MRNA نمونے کے لئے پیش کیا جاتا ہے اور یہ سی ڈی این کے ریورس ٹرانسمیشن اور پیداوار کی طرف سے حوصلہ افزائی کی جاتی ہے. QPCR استعمال کیا جاتا ہے پی سی آر کی مصنوعات کو اصل وقت کے دوران پی سی آر تھرمل سائیکل کے دوران فلوروسینٹ رنگوں یا لیبل شدہ تجربات کا استعمال کرتے ہوئے. QPCR میں، پی سی آر کی مصنوعات کی مقدار نمونے کی طرف سے اخراج فلوروسینٹ سگنل کی طرف سے پیش کی جاتی ہے. RT پی پی آر مقبول طور پر ایک پریسویشن پروسیسنگ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے جبکہ QPCR عام طور پر ایک مقدار کی پروسیسنگ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے. یہ RT پی آر آر اور قیسپیسی کے درمیان فرق ہے. حوالہ جات:

1. Deepak، SA، KR Kottapalli، R. Rakwal، G.Oros، KS Rangappa، H. Iwahashi، Y. Masuo، اور GK Agrawal. "ریئل ٹائم پی سی آر: جینیوں کی انقلاب سازی کا پتہ لگانے اور اظہار تجزیہ. "موجودہ جینیومکس.برٹھم سائنس پبلشرز لمیٹڈ، جون 2007. ویب. 03 اپریل 2017

2. Zeka، Fjoralba، Katrien Vanderheyden، ایلز ڈی Smet، کلاڈ اے Cuvelier، Pieter Mestdagh، اور جوے Vandesompele. "FFPE کے نمونے کی سیدھے اور حساس RT-qPCR کی بنیاد پر جین اظہار تجزیہ. "فطرت نیوز. فطرت پبلشنگ گروپ، 22 فروری 2016. ویب. 03 اپریل 2017

3. اوبربرگ، ایل، اے. جولیلی، ڈی والکیکس، بی ڈیالون، آر بیلون، اور سی ریاتی. "سیٹکوین جین اظہار کی مقدار کے لئے ریئل ٹائم ریورس ٹرانسپٹیز پی سی آر کا استعمال. "جیو بولوولوکلر تراکیب: جے بی ٹی. ایسوسی ایشن بومومولوکولر وسائل کی سہولیات، مارچ 2003. ویب. 03 اپریل 2017

تصویری عدالت:

1. صارف کے ذریعہ "تاقمان": بہادر مجنون - اصل اپ لوڈر (عوامی ڈومین) کے ذریعہ وینکس میگزین

2 کے ذریعہ اپنا کام. "ریپولیشن پولیمیریز چین ردعمل" Jpark623 کی طرف سے - اپنے کام (CC BY-SA 3. 0) وینیزوئین میکسیکو کے ذریعے