فرق جین کلونونگ اور پی سی آر کے درمیان فرق. جینی کلونونگ بمقابلہ پی سی آر

Anonim

کلیدی فرق - پی سی آر بمقابلہ جینی کلونونگ

ڈی این اے کی ایک مخصوص ڈی این اے کے مخصوص نسخے کی ڈی این اے کی ترکیب ڈی این اے پرسمیشن کہا جاتا ہے. جینی کلوننگ اور پی سی آر یعنی دو اہم ڈی این اے کی امپریشن پروسیسنگ ہیں. جینی کلوننگ اور پی سی آر کے درمیان اہم فرق یہ ہے کہ جینی کلوننگ ایک مخصوص جین کی میں vivo میں دوبارہ ملبوسات ڈی این اے کی تعمیر اور ایک میزبان بیکٹیریم کے اندر بڑھتی ہوئی ہے جبکہ پی سی آر لاکھوں کاپیوں کی پیداوار کرتا ہے. مخصوص ڈی این اے ٹکڑے ٹکڑے وٹرو میں ڈراپریشن اور ترکیب کے بار بار چلے گئے.

فہرست

1. جائزہ اور کلیدی فرق

2. جینی کلونونگ کیا ہے

3. پی سی آر کیا ہے

4. سائڈ موازنہ کی جانب سے سائیڈ - پی سی آر بمقابلہ جینی کلونونگ

5. خلاصہ

جینی کلوننگ کیا ہے؟

جینی کلوننگ ایک ایسی ٹیکنالوجی ہے جو دوبارہ ڈیبناینٹ ڈی این اے کی تعمیر کے ذریعے ایک حیاتیات کے نکاسی جینومک ڈی این اے سے مخصوص جین کو تلاش کرنے اور ضبط کرنے کے لئے ملازم ہے. جینیومک ڈی این اے پروٹین کے لئے الگ الگ مختلف جینوں میں مشتمل ہے. جب ڈی این اے نکالا جاتا ہے تو اس میں ممکنہ جین بھی شامل ہوسکتی ہے. جینی کلونونگ کی تکنیک نے مجموعی ڈی این اے سے مخصوص جین کا پتہ لگانے میں مدد کی ہے. لہذا جینی کلونٹنگ انوکل حیاتیات میں ایک اہم آلے کے طور پر کام کرتا ہے.

جینیاتی لائبریری بنانا جینی کلیننگ میں ضروری ہے اگر ڈی این اے میں متعلقہ جین کے مقام کے بارے میں کوئی اشارہ نہیں ہے. مندرجہ ذیل اقدامات کا استعمال کرتے ہوئے ایک جینومکیک لائبریری بنایا جاتا ہے.

مرحلہ نمبر 1:

ایک حیاتیات سے کل ڈی این اے کی نکاسی جس میں مطلوبہ جین ہوتی ہے. مرحلہ نمبر 2:

چھوٹے انتظام کرنے والا ٹکڑے پیدا کرنے کے لئے نکالا ہوئے ڈی این اے کی پابندی کے عمل انہی. یہ قدم پابندی ختم ہونے سے سہولت فراہم کی جاتی ہے.

مرحلے 3:

ایک مناسب ویکٹر کا انتخاب کریں اور اسی پابندی کے اختتام پر قابو پانے والے ویکٹر ڈی این اے کو کھولیں. بیکٹیریا پلاسمیڈ عام طور پر استعمال کیا جاتا ہے جیسے ویکٹر غیر ملکی ڈی این اے لے جاتے ہیں. پلازمین ڈی این اے کے بیکٹیریا کے اندر واقع چھوٹے حلقوں ہیں. مرحلہ 4:

رییکبینٹن ڈی این اے انوک پیدا کرنے کے لئے ویکٹر ڈی این اے اور تقسیم شدہ ڈی این اے کا مجموعہ. یہ قدم ڈی این اے کے لیگاس کی طرف سے کنٹرول کیا جاتا ہے. مرحلہ 5:

میزبان بیکٹیریا میں ریموٹینٹن ڈی این اے انوولوں کی منتقلی. یہ قدم تبدیلی کے طور پر جانا جاتا ہے، اور گرمی جھٹکا کا استعمال کرتے ہوئے کیا جاتا ہے. مرحلہ 5:

ثقافتی میڈیم پر تبدیل شدہ بیکٹیریل خلیوں کی اسکریننگ. تبدیلی کے عمل کے اختتام پر تبدیل اور غیر معتبر ہوسٹ سیلز کی ایک مخلوط آبادی حاصل کی جاتی ہے. دلچسپی کے جین کے طور پر صرف تبدیل میزبان خلیات میں شامل ہیں.لہذا، تبدیل شدہ خلیوں کو منتخب کرنا ضروری ہے. انتخاب انتخابی میڈیا کا استعمال کرتے ہوئے بنایا جاتا ہے جس میں اینٹی بائیوٹکس موجود ہے. اس اسکریننگ ذریعہ پر صرف منتخب شدہ خلیات کو منتخب کرنے میں اضافہ ہوتا ہے. مرحلہ 6: بیکٹیریا کی بڑھتی ہوئی جین لائبریری کی پیداوار. اس مرحلے میں، تبدیل شدہ میزبان خلیوں کو تازہ ثقافتی میڈیا میں متعارف کرایا جاتا ہے جس میں زیادہ سے زیادہ ترقیاتی ضروریات فراہم کی جاتی ہیں. ثقافت پلیٹوں پر کل کالونیوں نے اس حیاتیاتی جینومکیک لائبریری کی نمائندگی کی ہے.

مرحلہ 7: دلچسپی کے جین پر مشتمل دوبارہ تابکاری ڈی این اے انوول کو دوبارہ نوبنین ڈی این اے کے ہزاروں کلون ٹکڑے ٹکڑے سے دیکھا جانا چاہئے. یہ تحقیقات کے استعمال سے پورا کیا جاسکتا ہے جو مخصوص جین یا مخصوص پروٹین کے نتائج کو اس جین سے نشان زد کرتا ہے. بیکٹریی کالونی پر مشتمل دلچسپی جینی ایک بار پھر مجموعی کالونیوں سے شناخت کی جاتی ہے، یہ ممکن ہے کہ دوبارہ ملبشی پلاسمی کی لاکھوں کاپیاں جن میں جینی ہے.

جینی لائبریونگ جینی لائبریریوں کو قائم کرنے، استعمال کرنے میں خاص پروٹین، وٹامن، اینٹی بائیوٹکس، ہارمون، ترتیب اور نقشہ جات کی جینوموز پیدا کرنے میں استعمال کیا جاتا ہے، فارنکس وغیرہ میں افراد کی کثیر کاپیاں ڈی این اے بناتے ہیں Figure_1: جینی کلونونگ

پی سی آر کیا ہے؟

پولیمیریس چین ردعمل (پی سی آر) ایک ایسی ٹیکنالوجی ہے جس میں ڈی این اے ٹکڑے ٹکڑے کی ایک بڑی تعداد پیدا ہوتی ہے. مخصوص ڈی این اے کے ترتیب کے متوقع پرچارشین پی سی آر کے ذریعہ کے تحت> وٹرو

حالات میں حاصل کی جاتی ہے. یہ ٹیکنالوجی آلوکول حیاتیات میں ایک بہت ہی طاقتور ذریعہ ہے کیونکہ یہ ڈی این اے کا ایک چھوٹا نمونہ قابل استعمال رقم میں ضائع کر سکتا ہے. پی سی آر 1983 میں کیری مولس کی طرف سے متعارف کرایا گیا تھا اور اس انعام یافتی ایجاد نے انوکل حیاتیات میں بہت بڑی ترقی کی.

پی آر آر کی تکنیک 2 شکل میں دکھایا گیا ہے جیسا کہ پی ڈی آر کے ردعمل بار بار پی سی آر کے ردعمل کی پیروی کرتا ہے. ایک پی سی آر کے رد عمل تین مختلف درجہ حرارت پر ہونے والے تین اہم مرحلے پر مشتمل ہے؛ 94

0 سی، پر 68 0

سی اور 72 0 سی پر بھوک بڑھاؤ پر پریمینوں کی انننگ کرنے پر ڈی این اے سے دوچار جھڑپ کی ڈبل ڈینٹرننگ. لہذا، جب پی سی آر کی کارکردگی کا مظاہرہ کیا جاتا ہے تو، مناسب نقل کے لئے درجہ حرارت کی طول و عرض کو برقرار رکھا جانا چاہئے. PCR ٹیوبوں کے اندر پی سی آر مشین میں پی سی آر کی کارکردگی کا مظاہرہ کیا جاتا ہے. پی سی آر ٹیوبیں صحیح پی سی آر مرکب کے ساتھ بھری ہوئی ہیں جس میں ٹیمپلیٹ ڈی این اے، تاق پولیمریس، پرائمر، ڈی این ٹی پی اور بفر شامل ہیں. 94- 98 0 سی پر مکمل پورٹیبل بانڈوں کے درمیان ہینڈجنڈ بانڈ کو توڑنے کی طرف سے واحد پھنسے ہوئے ڈی این اے میں ڈبل پھنسے ہوئے نمونہ ڈی این اے کو مسترد کیا جاتا ہے. اس کے بعد ٹیمپلیٹ ڈی این اے کے ایک کنارے پر پرندوں کے لئے بے نقاب ہیں. پریمرز (آگے اور ریورس) کی ایک جوڑی فراہم کی جانی چاہیئے، اور وہ اعلی درجہ حرارت کو برداشت کرنے کے لئے ترموستی ہونا چاہئے. پرائمری ڈی این اے ٹکڑے ٹکڑے کے اختتام پر پرائمری واحد بھوک لگی ہوئی ڈی این اے کی ترتیبات تکمیل ہیں. مصنوعی پرائمر پی سی آر میں استعمال کیا جاتا ہے. پرائمری نمونہ ڈی این اے کے تکمیل اڈوں کے ساتھ پابند ہیں اور ایک نئی بھوک کی ترکیب پیدا کرتے ہیں. یہ قدم ٹق پولیمریس کہا جاتا ہے ایک اینجیم کی طرف سے catalyzed ہے؛ تھرمس ​​ایکٹیکیٹس سے الگ تھلگ ایک تھرستستستار ڈی این اے پالیمرس انزمی. جب پرائمر اور نیوکللیڈس (عمارت کے بلاکس) دستیاب ہیں، تاق پولیمیریس ڈیجیٹل ڈاینیم ڈی این اے کے ڈی این اے کی مکمل کنڈیشنگ کی تعمیر کرتا ہے.پی سی آر کے پروگرام کے اختتام میں، ڈی این اے ٹکڑے ٹکڑے ٹکڑے کر کے جیل الیکٹروفورسس کا استعمال کرتے ہوئے مشاہدہ کیا جاتا ہے. اگر مزید تجزیہ کی ضرورت ہو تو، پی سی آر کی مصنوعات کو جیل سے پاک کیا جاتا ہے. پی سی آر جینیاتی اور حاصل کردہ بیماریوں، مجرموں کی شناخت (فارنکس کے میدان میں) کے لئے بہت مفید ہے، ڈی این اے کے ھدف بخش طبقہ کی ساخت اور فنکشن کا مطالعہ، جینوموز آف حیاتیات کی ترتیب اور تعریف وغیرہ وغیرہ. پی سی آر سائنسدانوں کے درمیان طبی اور آلوکولر حیاتیات کے تحقیقی لیبارٹریوں میں ایک معمول لیبارٹری کی تکنیک بن گیا ہے کیونکہ اس سے مختلف قسم کے ایپلی کیشنز ہیں. Figure_2: پولیمیریس چین کا ردعمل جینی کلونونگ اور پی سی آر کے درمیان کیا فرق ہے؟ ماضی سے آرٹیکل مڈل ٹیبل سے پہلے <> پی سی آر بمقابلہ جین کلونونگ

جینی کلوننگ ایک مخصوص جین کی vivo

میں دوبارہ ملبوسات ڈی این اے کے ذریعے اور میزبان بیکٹیریم میں تبدیل کرنے کے عمل ہے..

پی سی آر کی تکنیک پی سی آر کے ردعمل کے بار بار چکروں کے ذریعہ ایک مخصوص ڈی این اے کے ترتیب کی ایک سے زیادہ کاپی تیار کرتا ہے

وٹرو

.

تعمیراتی ڈی این اے اے کے قیام کی ضرورت جین کا پتہ لگانے کے لئے ریبینٹنٹ ڈی این اے تیار کیا جاتا ہے. بحالی ڈی این اے تیار نہیں ہے. لیبر کی ضرورت یہ عمل محنت کش ہے. سخت محنت کی ضرورت نہیں ہے.
vivo یا وٹرو عمل میں
ریموٹینٹینن ڈی این اے کی تعمیر وٹرو میں ہے اور ڈی این اے کی پروموشن
وییو
میں ہے. ڈی این اے کی پریزنٹیشن مکمل طور پر
ویٹرو میں ہوتا ہے.
خلاصہ - پی سی آر بمقابلہ جینی کلونونگ جینی کلوننگ اور پی سی آر ڈی این اے کی افادیت کے لئے استعمال شدہ دو طریقے ہیں. پی سی آر ایک وٹرو عمل میں ہے جس میں کسی بھی ڈی این اے ٹکڑے ٹکڑے کی ڈی این اے کی زیادہ سے زیادہ کاپی ریموٹینٹن ڈی این اے اور میزبان حیاتیات کا استعمال کئے بغیر. جینی کلوننگ بنیادی طور پر ایک vivo عمل میں ہے جس کے نتیجے میں میزبان حیاتیات کے اندر دوبارہ دلچسپی ڈی این اے کی تعمیر کے ذریعہ ایک دلچسپی جینی کا نتیجہ ہوتا ہے. یہ جینی کلوننگ اور پی سی آر کے درمیان فرق ہے. حوالہ:

1. گریففس، انتھونی JF. "ایک مخصوص جین کلوننگ. "جدید جینیاتی تجزیہ. ایس ایس نیشنل لائبریری میڈیکل، 01 جنوری 1999. ویب. 22 فروری 2017

2. "پولیمیریس چین ردعمل (پی سی آر). "نیشنل سینٹر آف بائیو ٹیکنالوجی. ایس ایس نیشنل لائبریری آف میڈیکل، این. د. ویب. 22 فروری 2017 تصویری عدالت: 1. "شکل 17 01 06" سی این ایکس اوپن اسٹیکس کی طرف سے - (CC BY 4. 0) کالم ویکیپیڈیا کے ذریعے 2. "پی پی آر" کی طرف سے میڈیم - اپنے کام (CC BY-SA 3. 0) کالم ویکیپیڈیا کے ذریعہ